第8章(2)

简答题

1、简述生物样品内药物分析的性质。

生物样品内药物分析，又称体液药物分析、生物药物分析，是随着临床药学、临床药理学的发展和需要而建立起来的一门新兴学科，旨在通过各种分析手段，了解药物在生物样品内的数量和质量变化，获得药物代谢动力学的各种参数、药物在生物样品内的生物转化、代谢的方式和途径等信息，从而为药品生产、临床医疗、实验研究等方面对所研究的药物作出估计与评价，以及对药物的改进与发展作出贡献。

2、简述生物样品内药物分析在临床合理用药中的意义

影响血药浓度的因素很多，同一种给药方案难以对每一个病人都达到理想的治疗效果，为达到用药安全、合理、有效，必须设计个体化给药方案，这就需要进行治疗药物监测，以血药浓度为指标，达到个体化用药。

药物滥用、吸毒、运动员服用兴奋剂以及公安司法部门进行的法医毒物分析，均涉及到生物样品内药物(毒物)分析。阿片、颠茄、乌头、马钱子等均含有生物碱，这些物质既是药物，也是有毒物质，监测的对象也是以生物体液为主，所以生物样品内药物的分离分析方法，对滥用药物病人的求治，中毒病人的抢救，公安部门的破案均起到了重要作用。

开展上述药物的生物样品内研究，首先要解决的问题是建立生物样品内微量药物及其代谢物的分离分析方法。

3、简述生物样品内药物分析在药浓监测中的应用。

只有具有明确治疗范围，血药浓度和药效关系密切，且具有下列情况者，要求进行药浓监测：有效血药浓度范围窄、剂量小、毒性大的药物;药代动力学个体差异大、药理作用强、不易估计给药后的血药浓度的药物;药物的毒性反应与该药治疗的疾病症状相似，难以判断是剂量不足还是药物毒性所致;联合用药时，由于药物相互作用产生不良反应，需要调整药物剂量者;在短期内难于判断疗效的药物，预测药物能否达到预防效果;判断患者用药的依从性等要求进行药浓监测。

4、简述生物样品内药物分析在药代动力学研究中的应用。

在药代动力学研究中，常涉及药物在生物样品内的吸收、分布、代谢和排泄等过程，常研究药浓—时间曲线的变化。样品中药物浓度高低差别大，且通常要测定药物及其代谢物，因此要求分析方法必须具有足够的灵敏度和选择性。

5、简述生物样品内内源性物质的测定意义。

生物样品内内源性物质如氨基酸、激素类、肌酐、儿茶酚胺、过氧化脂质、草酸、尿酸等，在机体正常生理条件下均处在一定的浓度范围内，当这些物质在生物样品内的含量发生 明显变化或出现异常时，指示机体发生了病变。因此，测定生物样品内内源性物质的含量，对于疾病的诊断或及早预防具有重要的意义。

6、简述生物样品内药物分析的对象。

凡是生物样品内药物到达之处，如体液、器官、组织、排泄物等都是分析的对象，所以生物样品内药物分析的样本有血液、尿液、唾液、胆汁、淋巴液、泪液、脊髓液、汗液、乳汁、羊水、粪便、各种器官、组织以及呼出的气体。

生物样品内药物分析对象不仅是人体，也包括动物体。

7、生物样品内药物分析的目标是什么?

生物样品内药物分析的目标，不仅是母体药物也包括代谢产物，因为代谢产物常具有生理活性，弄清它们的种类、结构、数量及分布情况，可了解药物在生物样品内的变化及消除规律，这对安全用药和正确评价药物质量也是非常重要的。

8、生物样品内药物分析的干扰杂质有哪些?

体液和组织中的内源性物质，如蛋白质、多肽、脂肪酸、色素等，不仅能同药物结合，而且还常常干扰测定。代谢物、共存药物及各种外源性杂质都会干扰测定，因此，通常要对样品进行分离、纯化后再分析。同时生物样品中有多种代谢酶，取样后仍可作用被测物，使被测物不稳定。

9、简述药物在生物体内的存在状态。

药物进入生物样品内后，要经过吸收、分布、代谢和排泄等过程，血液成为药物在生物样品内转运的枢纽，绝大多数药物借助血液分布到作用部位或受体部位。一部分药物在血浆中与生物大分子蛋白质结合，不能自由地透过细胞膜，但这种结合是可逆的。药物到达受体、组织后又可与受体、组织结合，处在动态平衡状态。药物经生物转化生成的代谢物也同样具有上述与生物大分子结合的性质，因此生物样品内的药物量还是经常保持在某一水平，而随时间在不断变化。

10、生物体内进行药物代谢的主要部位有哪些?

生物样品内进行药物代谢的主要部位是肝脏，此外，肾、脾、肺、肠粘膜、胎盘等组织也有一定活性，但远比肝脏低。在肝脏中引起药物代谢的主要是在肝微粒体中存在的药物代谢酶。
 

11、简述生物体内药物的代谢反应。

生物体内药物的代谢反应可分为一相(第一阶段)和二相(第二阶段)代谢转化，两相反应均受相应的药物代谢酶催化。一相代谢是指药物在以细胞色素P450为核心的混合功能氧化酶等催化下发生氧化、还原、水解等反应，使药物分子结构增加了极性基团，水溶性增强，药物的活性发生改变(灭活、激活或作用类型改变)。二相代谢是指药物或经一相反应后的代谢物在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶等催化下，与葡萄糖醛酸、硫酸盐等结合，使药物分子的极性进一步增大，有利于从尿中排泄，结合过程通常使药物灭活。

12、简述尿药测定的应用意义。

尿药测定主要用于药物剂量回收、药物肾清除率及代谢物类型等研究，也可用于乙酰化代谢和氧化代谢多态性等研究，体内药物清除主要是通过尿液排出，药物以原型或代谢物及缀合物形式排出。

13、简述血液样品的一般贮存方法。

用血浆、血清作为样品时，应尽快从全血中离心分离出血浆、血清，一般最迟不超过24小时，分离后再冰冻保存。若不预先分离，则冰冻易引起细胞溶解，阻碍血浆或血清的分离，同时溶血会影响药浓变化。

14、简述尿液样品的一般贮存方法。

尿液主要成分是水、尿素及盐类，这是很好的细菌生长液，所以应在取样后立即测定，若收集24小时或更长时间的尿样或不能立即测定时，应置4℃ 冰箱保存;若在室温保存，应在采样后立即加入防腐剂;若需放置较长时间则需冷冻贮存。

15、简述生物样品中去除蛋白质的处理方法。

(1)利用蛋白质脱水沉淀：采用有机溶剂如乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等，或中性盐如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等使蛋白质脱水而沉淀。用乙腈除去蛋白质，产生的沉淀容易分离，应用比较广泛，当用1～3倍体积的有机溶剂时，可使90%以上的蛋白质沉淀。

(2)利用蛋白质形成不溶性盐沉淀：常用的为酸性沉淀剂，如三氯醋酸、高氯酸、苦味酸或重金属离子等使蛋白质沉淀。

(3)其他方法：加热使蛋白沉淀，适用于样品对热稳定者。可将样品置沸水浴中，使蛋白质直接变性生成沉淀。或者采用超滤和透析方法，除去体液样品中的蛋白质，但费时，在分析大量的样品时，受到一定的限制。应用超滤和透析方法，在处理过程中样品内蛋白质并未变性，结合的待测成分未能被解脱出来而不能检出，此方法可测得血清或血浆中游离的待测成分的浓度。

16、生物样品中缀合物(结合物)的水解有哪些方法?

药物在生物样品内经二相代谢后，在血浆及尿中呈缀合物形式存在，最常见的有葡萄糖醛酸苷和硫酸酯。含有羟基、羧基、氨基、巯基功能团的药物分子可与葡萄糖醛酸形成葡萄糖醛酸苷缀合物，具有酚羟基的药物、芳胺及醇类药物则与硫酸形成硫酸酯缀合物。它们的极性均较母体药物大，是亲水性的或在生理pH值下是电离的，不易被有机溶剂提取，需要作水解处理，使缀合物中的药物或代谢物游离出来，再用有机溶剂提取。常用的缀合物水解方法有：酸水解、酶水解、溶剂解。

17、简述生物样品的冷冻干燥处理方法。

冷冻干燥是对某些生物样品进行贮存和预处理的有效方法。此法适合于一次不能完成分析的大批量生物样品、水溶性很强的样品、挥发性样品和对热不稳定的样品。

生物样品的冻干处理可用干冰—丙酮浴或用液氮进行。经冻干处理后样品中的水分和其他挥发性杂质因升华而被除去，使样品达到干燥。如此处理的样品，常常可加入适当的有机溶剂后直接测定。样品冻干处理时，在挥发或升华过程中有可能损失一部分药物，对此，可先进行衍生化处理，降低挥发性后再行冻干处理。

18、简述生物样品中待测组分的富集方法。

提取所得溶剂量常为数毫升，往往还不能直接供GC、HPLC测定。因受进样量的限制，所以需要采取浓集办法。最常用的方法为真空蒸发(注意防止暴沸)或直接通入气流使溶剂挥发。一般通入压缩空气，遇氧不稳定的组分可改用氮气。根据溶剂的挥发性和组分的热稳定性，必要时可将提取液置一定温度的水浴中，以加快挥发。